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電泳的相關(guān)技術(shù)知識(shí)
更新時(shí)間:2009-10-27   點(diǎn)擊次數(shù):3930次

電泳法,是指帶電荷的供試品(蛋白質(zhì)、核苷酸等)在惰性支持介質(zhì)(如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)中,于電場的作用下,向其對(duì)應(yīng)的電極方向按各自的速度進(jìn)行泳動(dòng),使組分分離成狹窄的區(qū)帶,用適宜的檢測(cè)方法記錄其電泳區(qū)帶圖譜或計(jì)算其百分含量的方法。  

電泳技術(shù)的基本原理和分類

在電場中,推動(dòng)帶電質(zhì)點(diǎn)運(yùn)動(dòng)的力(F)等于質(zhì)點(diǎn)所帶凈電荷量(Q)與電場強(qiáng)度(E)的乘積。FQE質(zhì)點(diǎn)的前移同樣要受到阻力(F)的影響,對(duì)于一個(gè)球形質(zhì)點(diǎn),服從Stoke定律,即:F6πrην式中r為質(zhì)點(diǎn)半徑,η為介質(zhì)粘度,ν為質(zhì)點(diǎn)移動(dòng)速度,當(dāng)質(zhì)點(diǎn)在電場中作穩(wěn)定運(yùn)動(dòng)時(shí):FFQE6πrην

可見,球形質(zhì)點(diǎn)的遷移率,首先取決于自身狀態(tài),即與所帶電量成正比,與其半徑及介質(zhì)粘度成反比。除了自身狀態(tài)的因素外,電泳體系中其它因素也影響質(zhì)點(diǎn)的電泳遷移率。

電泳法可分為自由電泳(無支持體)及區(qū)帶電泳(有支持體)兩大類。前者包括Tise-leas式微量電泳、顯微電泳、等電聚焦電泳、等速電泳及密度梯度電泳。區(qū)帶電泳則包括濾紙電泳(常壓及高壓)、薄層電泳(薄膜及薄板)、凝膠電泳(瓊脂、瓊脂糖、淀粉膠、聚丙烯酰胺凝膠)等。

自由電泳法的發(fā)展并不迅速,因?yàn)槠潆娪緝x構(gòu)造復(fù)雜、體積龐大,操作要求嚴(yán)格,價(jià)格昂貴等。而區(qū)帶電泳可用各種類型的物質(zhì)作支持體,其應(yīng)用比較廣泛。本節(jié)僅對(duì)常用的幾種區(qū)帶電泳分別加以敘述。
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